液相色谱仪（LC）是一种常用的分析仪器，其使用方法可分为以下步骤：
一、仪器准备
开机与初始化 - 打开电源，确保计算机与仪器连接正常，启动Bootp Server和色谱软件。
- 检查各组件电源是否开启，冷却水和空气压缩机运行正常。
流动相配置与过滤
- 按实验要求配制流动相（如甲醇/水、酸/碱缓冲液），使用0.45μm滤膜过滤，去除颗粒物和气泡。
- 若流动相为含盐或缓冲体系，需先用纯水冲洗色谱柱（10-20倍柱体积）后再进行测试。
色谱柱安装与平衡
- 安装色谱柱时确保卡套柱两端卡套连接紧密，预柱安装规范。
- 使用流动相冲洗色谱柱30分钟，待基线稳定后进行平衡测试，平衡流速通常为1.0-2.0 mL/min。
二、样品处理与进样
样品前处理
- 根据样品性质进行溶解、过滤、离心等预处理，去除杂质和浓稠物质。
- 对于特殊样品（如含蛋白、多糖等），需使用专用溶剂和添加剂。
进样操作
- 使用注射器或自动进样器将样品注入进样器，确保进样针清洁且无残留。
- 设置进样体积和流速，避免气泡进入管路。
三、参数设置与分析
仪器参数配置
- 设置检测波长（如紫外光、荧光检测）、流速（通常为3-10 mL/min）、柱温（根据流动相和样品调整）。
- 配置梯度程序（如pH梯度、盐度梯度），用于复杂样品的分离。
基线校正与检测
- 启动仪器后，通过空白试验排除系统污染，待基线稳定后进行样品分析。
- 记录色谱峰面积、保留时间等参数，与标准品对比或进行定量分析。
四、维护与关机
日常维护
- 定期清洗进样器、检测器、色谱柱，使用去离子水或专用清洗剂。
- 更换滤膜时注意避免交叉污染，超声脱气可减少管路残留。
关机流程
- 先关闭检测器电源，再停泵，最后关闭仪器总电源。
- 清洗色谱柱时，流动相需更换为去离子水或有机溶剂，避免残留。
注意事项
流动相兼容性： 不同色谱柱需使用对应的流动相（如乙腈/水、甲醇/正庚烷），避免溶剂不匹配导致柱子损坏。 系统校准
安全防护：操作有机溶剂时需佩戴防护装备，避免皮肤接触和吸入危害。
通过以上步骤，可规范使用液相色谱仪，确保分析结果的可靠性和重现性。
